花卉培养基质 花卉快速繁殖培养基一般包括基础成分

本文目录

1. 花卉快速繁殖培养基一般包括基础成分
2. 花卉的原生质体有哪些实验
3. 花卉的培养基要怎样配制

花卉快速繁殖培养基一般包括基础成分

.培养基的配制：对于经常使用的培养基，可先将各种药品配成10倍或100倍的母液，放入2~4℃的冰箱中保存，用时再按比例稀释。

(1)母液的配制：

①大量元素母液.配成10倍液。用感量0.01克天平称取大量元素，分别溶解后按顺次混合，加蒸馏水使其总量达1升，即为大量元素的母液。配培养基时，每配1升取母液100毫升。

②微量元素母液：因用量小，常配成100倍或1000倍母液，即将每种化合物的量加大100倍或1000倍。逐次溶解并混在一起。在配制1升培养基时，取母液10毫升或1毫升。为了配制不同培养基时使用方便，也可将维生素类物质分别配制。配制时用感量0.001克的天平称取。

③铁盐母液：铁盐是单独配制的，用感量0.01克天平称取，分别溶解、混合加水定容至500毫升。每升培养基取此液5毫升。

④维生素母液：用感量0.001克的天平称量，分别用容量瓶配成所需的浓度(0.1~10毫克/升)，用时按培养基配方中要求的量分别加入。

⑤植物激素的配制：单个称量，分别贮藏，一般配成0.1~0.5毫克/毫升的溶液。由于多数激素难溶于水，可采

用以下方法配制。IAA(叫噪乙酸)：先溶于少量95%酒精中，再加水至一定浓度。NAA(蔡乙酸)：可溶于热水中，也可用少量95%酒精溶解，再加水至一定浓度。2,4一D：不溶于水中，可用lmol/L的NaOH溶解后，再加水至一定浓度。犷KT(6一吠喃氨基嗓吟)及BA(6一苇基嗦岭)：先溶于少量的Imol/L盐酸中，再加水至一定浓度。激素的用量，一般采用ppm及mol/L表示。

(2)培养基的配制：

①根据采用培养基配方的要求，从母液中取出(用量筒或移液管)所需要的大量元素、微量元素、铁盐、维生素及

植物激素等，放于烧杯中，加蒸馏水补足1000毫升。

②把琼脂放入少量水中，加热使其溶化后，加入①中，并不断搅动使其混合均匀。

③用pH计或pH试纸测pH值。用Imol/L的氢氧化钠或Imol/L的盐酸，将pH值调至要求的值。

④把配好的培养基用漏斗分装到培养用的玻璃容器内(试管、三角瓶或罐头瓶均可)。这些玻璃器皿要事先清洗干净、烤干。分装后用牛皮纸、铝铂纸或用2~3层称量纸包扎封口。准备高压灭菌。

⑤高压灭菌。一般采用1.1公斤/平方厘米压力消毒15~ 2O分钟。不可时间过长或温度过高，以免引起培养基的不和变化。灭菌后的培养基最好置于4~5℃条件下保存，含IAA的培养基要在一周内使用，其他培养基也不要超过一个月。正常情况下半月内用完。

花卉的原生质体有哪些实验

Furuta等利用电融合法诱导菊花和苦艾（emphasis：role=italicA.sieversianaemphasis）叶肉原生质体融合，获得了比菊花表现出更强的抗锈病能力的属间杂种。Varotto等将菊苣叶肉原生质体与一个向日葵胞质雄性不育系的下胚轴胞质体（经γ-射线照射处理）进行融合，获得了胞质雄性不育的杂种材料。Rambaud等诱导二倍体菊苣（emphasis：role=italicCichoriumintybusemphasis）自身的原生质体融合创造了四倍体材料，其诱导频率要远远高于用秋水仙素诱导。另外，利用一亲本的原生质体与另一亲本的微原生质体（微核或只含有细胞质的原生质体或者只含有几条染色体的微核等，这种微原生质体可根据需要制备含有特定染色体）进行融合，从而只转移某一条或几条带有优良基因的染色体，即只转移亲本的优良性状。Binsfeld等将向日葵下胚轴原生质体与多年生向日葵属植物emphasis：role=italicH.giganteusemphasis和emphasis：role=italicH.maximilianiemphasis的微核进行融合，创造了含有28条野生种染色体的杂种植株。由于原生质体是单细胞系统，没有或较少受周围细胞和微环境的影响，再生植株也是由单细胞发育而来，性状易纯化且稳定遗传，所以向原生质体导入外源基因比向其他外植体导入外源基因有更大的优势。

目前，虽然已经建立了很多种菊科植物的原生质体再生体系，但是同一种材料的不同栽培品种之间的原生质体再生能力差异很大，有的种上只是建立了某个品种的再生体系，但不一定是优良或目标改良品种； 在菊科中，还有一些重要作物原生质体再生困难。原生质体融合只能得到杂种细胞而未能得到杂种植株，或者杂种植株性状较差（不育、生根能力差、生长势较弱等），或者虽然转入了亲本的优良性状但同时也带入了亲本的不良性状等。 就目前的研究结果来看，体细胞杂种的实用性是菊科植物原生质体融合中最大的问题。针对这些问题，采用不对称融合和原生质体遗传转化等方法可以转移某一或几条染色体甚至某个外源基因，从而定向改造某些性状，创造出性状优良的材料；同时应将细胞融合（对称、不对称融合）、遗传转化等与常规育种方法结合起来，更有效地转移优良性状，创造优异种质，这也将是今后菊科植物原生质体研究的重点。

另外，还要充分利用原生质体单细胞这个特点，研究各种重要的生理现象和过程，解决一些悬而未决的问题。作为单子叶植物的兰花，原生质体培养和融合与双子叶植物相比所取得的成功非常有限，目前，已从卡德丽亚兰、石斛兰、蕙兰、蝴蝶兰等十几种兰花分离得到原生质体。外植体的来源有根、叶、原球茎、花瓣等，不同的外植体难度各有不同。兰花原生质体的融合比原生质体的分离培养难度更大，成功报道很少，Neuman先后用蝴蝶兰、石斛兰、肾药万代兰为材料，得到3%5%的融合原生质体；台湾的Chen：WH等从几种蝴蝶兰的根、叶、花瓣、原球茎得到了大量的原生质体，试验证实，从试管苗幼叶能得到高质量的原生质体，存活率约90%，通过电融合，融合率达10%，研究者们还从酶液、培养方式及培养基的选择等方面进行了有益的探索。

花卉的培养基要怎样配制

培养基的配制：配制培养基时通常以1升为一个容量单位，先在量筒内放少量50摄氏度左右的蒸馏水，再按配方中所列顺序逐个投药，待一种药剂溶化后再放另一种药剂，药剂全部溶化后，根据需要再加入一定量的生长调节物质，补充蒸馏水至1升，最后加入加热熔化好的琼脂。这时将配好的培养基再用1摩尔的NaOH调整pH（1摩尔的NaOH的配制方法是：称取40克NaOH溶于1升蒸馏水中，混匀即可）。

调整时用酸度计或精密试纸测定，使之达到培养基的酸碱度要求（一般保持pH5.4～5.8较好）。调好酸碱度后趁热分装试管或三角瓶中，盖好棉塞，做上标记。待琼脂冷凝后再用牛皮纸包扎，然后放入高压锅中灭菌，压力为1.2千克/平方厘米，保持20分钟即可。冷却后可放培养室预培养3天，没有杂菌污染则可取花卉材料进行接种。要注意，培养基配好后应立即进行高压灭菌，以防腐败变质。